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垂盆草水提取物与醇提取物对腹腔肿瘤模型小鼠的抑癌作用

2020-07-20 10:29 出处:未知 人气: 评论(0
  [摘要]目的:探究垂盆草水提取物与醇提取物对腹腔肿瘤模型小鼠的抑癌作用。方法:建立30只小鼠S180肉瘤模型和S180腹水癌模型,随机分为6组,每组5只,包括对照组(不给药),垂盆草水提取物低剂量组(给药剂量3.33 g/kg)、高剂量组(给药剂量6.67 g/kg),垂盆草醇提取物低剂量组(给药剂量3.33 g/kg)、高剂量组(给药剂量6.67 g/kg),环磷酰胺组(给予环磷酰胺40 mg/kg)。实体瘤模型小鼠统计各组的平均瘤重及抑瘤率。腹水瘤模型小鼠统计各组的平均生存天数及生命延长率。结果:垂盆草用药组及环磷酰胺组的瘤重均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);除环磷酰胺组外,垂盆草醇提取物高剂量组的瘤重最低,抑瘤率最高,与其他各组相比差异有统计学意义(P<0.05)。垂盆草用药组及环磷酰胺组小鼠的生存天数均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);除环磷酰胺组外,垂盆草水提取物低剂量组小鼠的生存天数最长,生命延长率最高,与其他各组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:垂盆草水提取物和醇提取物对小鼠移植性肿瘤均有明显的抑制作用,可延长荷瘤小鼠的生存时间,但提取物剂量与疗效并无明显相关。
 
  [关键词]腹腔肿瘤;小鼠;垂盆草;水提取物;醇提取物
 
  垂盆草sedum sarmentosum Bunge属于常用中草药,系景天科多年生草本植物,多为干燥全草入药,全国大部分地区均有生长,药性凉,味甘、淡,具有清热解毒的作用,中医临床组方多用于小便不利、黄疸、多种湿热病症等。现代药理学研究表明,垂盆草具有肝细胞保护作用,同时可减轻机体的炎症反应,在治疗急慢性肝炎方面有着较好的应用[1-2]。研究表明,垂盆草具有解毒抗癌、消炎退肿的作用[3],但关于垂盆草抗癌的基础研究报道较少。本文就垂盆草水提取物与醇提取物对腹腔肿瘤模型小鼠的抑癌作用进行了研究分析,现报道如下:
 
  1材料与方法
 
  1.1动物选择60只KM小鼠,清洁级,体质量19~21 g,均为雄性,由广东省医学实验动物中心提供,实验动物许可证号:SCXK(粤)2013-0002,实验动物合格证号:44007200013876。
 
  1.2试剂S180腹水瘤株(上海酶联生物耗材有限公司);环磷酰胺(浙江海正药业股份有限公司提供);垂盆草干品(北京同仁堂股份有限公司提供);提取物制备:1)醇提取物制备,将400 g垂盆草干品粉碎,通过70乙醇回流提取2次,每次1 h,合并提取液,取一部分液体通过旋转蒸发仪进行浓缩,至无醇味为止,保存于5℃下备用。2)水提取物制备,将250 g垂盆草干品加水加热,煮沸后继续煎煮20 min,趁热过滤,蒸发浓缩后置于5℃下备用。
 
  1.3实验方法
 
  1.3.1给药剂量根据垂盆草临床应用的常规剂量(一般人体用量在每日15~30 g,取每日20 g),根据剂量体质量比计算,设低剂量组(3.33 g/kg)和高剂量组(6.67 g/kg)。
 
  实体瘤模型取1只小鼠接种S180腹水瘤7 d天颈椎脱臼处死,无菌条件下提取腹水,取6只小鼠,将腹水接种于腹腔中,剂量每只1 mL,培养9天后选择生长良好的2只小鼠处死,取S180瘤液用生理盐水按照1∶2的比例进行稀释,选择30只小鼠分为6组,每组5只,将稀释后的瘤液密度为5×106/mL的单细胞悬液以200μL/只的体积,接种于小鼠右腋皮下,接种完成8 h后给药,根据给药方案及剂量不同分别为对照组(不给药)、垂盆草水提取物低剂量组(给药剂量3.33 g/kg)、
 
  垂盆草水提取物高剂量组(给药剂量6.67 g/kg)、
 
  垂盆草醇提取物低剂量组(给药剂量3.33 g/kg)、
 
  垂盆草醇提取物高剂量组(给药剂量6.67 g/kg)、
 
  环磷酰胺组(给予环磷酰胺40 mg/kg),垂盆草组小鼠均通过灌胃给药,环磷酰胺组则进行腹腔注射,对照组给予等容生理盐水,连续给药8天后处死,剥离皮下瘤块进行称重,计算抑瘤率。
 
  抑瘤率=(对照组平均瘤重-给药组平均瘤重)/对照组平均瘤重×100
 
  1.3.3腹水瘤模型接种方案与实体瘤模型小鼠相同,接种9天后选择生长良好的2只小鼠取腹水用生理盐水1∶2稀释,同样取30只小鼠随机分为6组,每组5只,将稀释后的腹水对小鼠进行接种,0.2 mL/只,接种8小时后给药,给药方案与实体瘤模型相同,记录各组小鼠的死亡时间,计算生命延长率。生命延长率=(给药组平均生存天数-对照组平均生存天数)/对照组平均生存天数×100。
 
  1.4观察指标实体瘤模型小鼠统计各组的平均瘤重及抑瘤率。腹水瘤模型小鼠统计各组的平均生存天数及生命延长率。
 
  1.5统计学方法采用SPSS 20.0进行数据处理,计量资料用(χ±s)表示,采用单因素方差分析,计数资料采用χ2检验,检验水准为α=0.05。
 
  2结果
 
  2.1实体瘤模型垂盆草用药组及环磷酰胺组的瘤重均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);除环磷酰胺组外,垂盆草醇提取物高剂量组的瘤重最低,抑瘤率最高,与其他各组相比差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。
  2.2腹水瘤模型垂盆草用药组及环磷酰胺组小鼠的生存天数均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);除环磷酰胺组外,垂盆草水提取物低剂量组小鼠的生存天数最长,生命延长率最高,与其他各组相比,差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。
  3讨论
 
  近年来多种中药的抗癌作用逐渐被发掘,成为肿瘤治疗的研究热点[4]。垂盆草多用于蛇虫咬伤、痈疽疮疡、咽喉肿痛等疾病的治疗,现代药理学研究[5-6]表明,该药物能够起到保护肝脏细胞并控制炎症反应的作用,能够有效降低丙氨酸氨基转移酶水平,因此在治疗急慢性肝炎方面有较好疗效。由于传统的抗肿瘤治疗多存在严重的不良反应,且长时间用药可能出现耐药现象,因此寻找更加有效、安全的抗肿瘤药物是当前研究中的重点[7-8]。相关研究表明,垂盆草具有一定的抗肿瘤作用,对人肝癌细胞HepG2有着较好的抑制效果。但目前临床关于垂盆草提取物抗肿瘤作用的基础研究较少[9-10]。
 
  本研究分别对垂盆草的水提取物和醇提取物抗肿瘤作用进行了研究,剂量选择参照人体用药的常规剂量进行换算得出,这个剂量标准可能有失偏颇,仍需进一步试验探寻。从本研究数据来看,垂盆草用药组及环磷酰胺组的瘤重均显著低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);除环磷酰胺组外,垂盆草醇提取物高剂量组的瘤重最低,抑瘤率最高,与其他各组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。研究结果表明无论是水提取物还是醇提取物均能够有效的抑制实体瘤的生长,其中醇提取物高剂量应用的抑瘤率最好。从腹水瘤模型研究来看,垂盆草用药组及环磷酰胺组小鼠的生存天数均显著高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);除环磷酰胺组外,垂盆草水提取物低剂量组小鼠的生存天数最长,生命延长率最高,与其他各组相比差异有统计学意义(P<0.05)。研究表明在对腹水瘤模型小鼠的治疗上,水提取物的效果更好,且低剂量组小鼠的生存时间最长。
 
  以上研究表明垂盆草的水提取物和醇提取物均能够起到有效的抑瘤作用,同时延长小鼠的生存时间,但在最佳用药选择方案上仍未表现出明显的特性,尚需进一步研究证实。
 
  参考文献
 
  [1]牛晓峰,刘霞,潘兰,等.佛甲草中甾醇类成分的研究[J].中国中药杂志,2011,36(10):1319-1321.
 
  [2]潘金火,潘萍.垂盆草总黄酮中8种单体成分对肝细胞的保护作用[J].中国医院药学杂志,2010,30(19):1621-1623.
 
  [3]廖跃华,吴丽珍.佛甲草抗炎作用研究[J].中国实验方剂学杂志,2011,17(3):142-144.
 
  [4]JIANG W L,XU Y,ZHANG S P,et al.Tricin 7-glucoside protects against experimental cerebral ischemia by reduction of NF-κB and HMGB1 expression[J].Eur J Pharm Sci,2012,45(1-2):50-57.
 
  [5]XU R,CHEN Y J,et al.Identification of four Sedum plant medicines by fourier transform infrared spe-ctra[J].Pharmacognosy Magzine,2012,8(30):107-110.
 
  [6]王璐瑶,陈雨洁,万定荣.景天属几种药用植物及混淆品的叶表皮比较鉴定[J].中华中医药杂志,2012,27(10):2672-2675.
 
  [7]刘美子,罗焜,姚辉,等.应用ITS2序列鉴定垂盆草及其混淆品[J].中国现代中药,2011,13(12):29-38.
 
  [8]PEREIRA M,PELETIRO B,CAPEWELL S,et al.Changing pat-terns of cardiovascular diseases and cancer mor-tality in Portugal,1980-2010[J].BMC Public Health,2012,12(1):1126-1131.
 
  [9]陈雨洁,皮珍平,刘新桥,等.两种景天属植物药中总黄酮的提取纯化[J].医药导报,2011,30(3):345-347.
 
  [10]王璐瑶.佛甲草等景天属植物药中黄酮类物质的抗肿瘤活性研究及含量测定[D].武汉:中南民族大学,2013.
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